> Aktualności > Wiadomości branżowe

Dlaczego hodowla komórkowa najpierw dokonuje lizy krwinek czerwonych?

2022-12-23

Podstawowe wprowadzenie
Lizat erytrocytów jest jedną z najprostszych i najłatwiejszych metod usuwania krwinek czerwonych, czyli rozszczepienia krwinek czerwonych za pomocą lizatu, który nie uszkadza komórek jądrzastych i może w pełni usunąć krwinki czerwone. Rozszczepianie lizatu to łagodna metoda usuwania czerwonych krwinek, która jest stosowana głównie do oddzielania i oczyszczania komórek tkankowych rozproszonych przez trawienie enzymatyczne, oddzielania i oczyszczania limfocytów oraz usuwania czerwonych krwinek w eksperymentach z białkiem tkankowym i nukleinowym ekstrakcja kwasem. Komórki tkankowe otrzymane przez lizat krwinek czerwonych nie zawierają krwinek czerwonych i mogą być dalej wykorzystywane do hodowli pierwotnej, fuzji komórek, cytometrii przepływowej, separacji i ekstrakcji kwasu nukleinowego i białka itp.

Instrukcja użycia
Próbka komórek tkankowych
1. Świeże tkanki trawiono trzustką/enzymem lub kolagenazą i dyspergowano w zawiesinie pojedynczych komórek, a supernatant odrzucano przez wirowanie.

2. Wyjąć lizat ELS z lodówki w temperaturze 4°C, dodać lizat ELS do osadu komórkowego w stosunku 1:3-5 (dodać 3-5 ml lizatu na 1 ml sprasowanych komórek), delikatnie przedmuchać i wymieszać.

3. Wirować przy 800-1000 obr./min przez 5-8 minut i odrzucić górną czerwoną klarowną ciecz.

4. Wytrąconą część zebrano i odwirowano 2-3 razy z roztworem Hanka lub roztworem hodowlanym wolnym od surowicy.

5, jeśli pękanie nie jest kompletne/kompletne, można powtórzyć kroki 2 i 3.

6. Zawieszanie komórek do kolejnych eksperymentów; Jeśli ekstrahuje się RNA, najlepiej zrobić to w roztworze przygotowanym w kroku 4 przy użyciu wody DEPC

Krwinki czerwone mają bardzo krótki cykl życiowy, tylko 120 dni, ale rozmnażają się bardzo szybko iw tym przypadku są szczególnie zdolne do podziału komórek i są najszybciej dzielącymi się komórkami ze wszystkich, więc ta komórka jest bardzo cenna, więc jest to bardzo przydatne w hodowli komórkowej. To bardzo proste, nie ma w sobie żadnych organelli, tylko błony komórkowe i białka.

Poprzedni:Jakie są funkcje zestawu ELISA?

Następny:Wymagania dotyczące odczynników i podstawowe przedstawienie stężenia roztworu.